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凝膠成像系統的用途
凝膠成像系統的用途
凝膠成像系統
的用途:
1、分子量定量。對于常用的DNA膜,利用分子量量化功能在膠上標注DNA Marker條帶的已知分子量,自動生成擬合曲線,并以此測量未知條帶的分子量。用這種方法得到的結果比肉眼估計的結果要準確得多。
2、定量密度。測定DNA和RNA濃度常用的方法是紫外吸收法,但只能測定樣品中總核苷酸濃度,不能區分不同長度片段的濃度。利用凝膠成像系統和軟件,先標定DNA膠片上某個已知DNA含量的標準條帶的密度,然后方便點擊其他未知條帶,通過與已知條帶的密度對比,即可得到未知DNA含量。該方法也適用于測定PAGE蛋白膠帶的濃度。
3、密度掃描。在分子生物學和生物工程的研究中,常用的方法是計算蛋白質表達產物在整個細菌蛋白質中的百分比。傳統的方法是使用特殊的密度掃描,但這項工作可以通過使用生物分析軟件結合實驗室常規掃描儀直接照射的凝膠成像系統來完成。
4、PCR定量主要是指,如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條,那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言,與密度掃描類似,但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量并計算其占總和的百分數,密度掃描時并對選擇區域生成縱向掃描曲線圖并積分。
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