如何計算DNA片段的長度

那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關于如何計算DNA片段的長度：
在測量比細胞小得多的DNA片段的長度時，微生物學家需要技巧，而方便的方法是凝膠電泳儀。此方法依賴于DNA片段帶電的事實，它是更昂貴的方法（例如X射線晶體學）的替代方法，該方法負責發現DNA的雙螺旋結構。
凝膠電泳的工作原理
由于DNA分子帶電，因此會受到電流的影響。當您將它們放在中性凝膠中并在凝膠上通電時，分子會向正極（陽極）遷移。因為不同大小的DNA分子帶有相同的電荷，所以較小的分子會更快地傳播，因此此過程將分子分成多個條帶，可以與已知大小的樣本進行比較。
電泳基本程序
該凝膠通常由瓊脂糖制成，瓊脂糖是一種多糖，在緩沖溶液中加熱后會形成半固體，微孔凝膠。在一端，凝膠形成微小的凹痕，稱為孔，研究人員將研究中的DNA樣品與已知長度的參考樣品（稱為DNA階梯）放置在一起。階梯片段的長度已經通過另一種方法例如X射線晶體學來預定。
當凝膠浸入導電溶液中并施加電壓時，碎片開始遷移通過凝膠-先是較小的碎片，然后是較大的較慢的碎片。它們終根據大小形成類似頻譜的波段。
一旦發生這種情況，研究人員將關閉電源，用DVA結合染料注入凝膠，并在紫外線下檢查樣本。使用梯子作為參考，研究人員可以確定可見帶中每個片段的大小。只有條帶可見–單個DNA片段太小而看不見。
確定未知片段的長度
并非樣品中的每個譜帶都有可能與階梯上的譜帶配對，因此，為了確定這些未知片段的大小，科學家通常會繪制一個圖。x軸上的是梯子中每個頻段的行進距離（以毫米為單位），而y軸上的是每個頻段的大小。當這些點通過曲線連接時，在測量該帶行進的距離（以毫米為單位）后，可以從曲線中推斷出任何帶的大小。
 
 
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