分子篩（凝膠過濾層析）蛋白純化系統的應用領域

分子篩（凝膠過濾層析）蛋白純化系統的應用領域
分子篩層析也并非一無是處，其應用領域主要包括以下方面：
1）脫鹽：
高分子（如蛋白質、核酸、多糖等）溶液中的低分子量雜質，可以用分子篩層析除去，這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便、快速，蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易失活，樣品體積可達柱床體積的25%-30%，為了防止蛋白質脫鹽后溶解度降低會形成沉淀吸附于柱上，一般用醋酸銨等揮發性鹽類緩沖液使層析柱平衡，然后加入樣品，再用同樣緩沖液洗脫，收集的洗脫液用冷凍干燥法除去揮發性鹽類。
2）分離提純：
分子篩層析已廣泛用于酶、蛋白質、氨基酸、多糖、激素、生物堿等物質的分離提純。
3）測定高分子物質的分子量：
用一系列已知分子量的標準品放入同一凝膠柱內，在同一條件下層析，記錄每一分鐘成分的洗脫體積，并以洗脫體積對分子量的對數作圖，在一定分子量范圍內可得一直線，即分子量的標準曲線。測定未知物質的分子量時，可將此樣品加在測定了標準曲線的凝膠柱內洗脫后，根據物質的洗脫體積，在標準曲線上查出它的分子量。
4）高分子溶液的濃縮：
通常將Sephadex G-25或50干膠投入到稀的高分子溶液中，這時水分和低分子量的物質就會進入凝膠粒子內部的孔隙中，而高分子物質則排阻在凝膠顆粒之外，再經離心或過濾，將溶脹的凝膠分離出去，就得到了濃縮的高分子溶液。

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